一、产品简介:
在Western blot实验中,完成一抗、二抗孵育及化学发光检测后,常常需要检测内参蛋白(如Tubulin、Actin)或其他目标蛋白以进行数据归一化或对比分析。通过使用Western一抗二抗去除液(Stripping Buffer),可以有效去除膜上已结合的一抗和二抗,从而实现蛋白膜的重复利用。相比重新跑SDS-PAGE凝胶,使用去除液不仅节省时间和精力,还能避免因重新上样带来的批次差异,提高实验数据的可比性和准确性。使用本Western抗体剥离液(强碱型),通常可将同一张膜重复多次利用。虽然每次处理后蛋白信号可能会有所减弱,但经多种抗体验证,本产品在保持膜上蛋白稳定性方面表现优异。操作简便,整个去除过程约需20分钟,随后即可直接进行封闭和后续的Western检测。
二、保存条件:
室温保存,一年有效。
三、使用说明:
1. 将曝光结束的蛋白印迹膜充分浸入适当体积的Alphabio®抗体剥离液中,抗体剥离液要充分覆盖膜的表面,在脱色摇床上,室温中漂洗5-10分钟,弃去剥离液。
2. 使用TBST或PBST缓冲液漂洗3次,每次在摇床上漂洗3–5分钟。
3. 继续使用Alphabio®的快速封闭液或其他封闭液进行封闭(blocking)
4. 进入后续Western blot实验操作。
四、注意事项:
1. 建议先检查表达量低的蛋白和磷酸化的靶蛋白,再用Alphabio® 抗体剥离液 (强碱型) 处理印迹膜后, 检测表达量高的蛋白。
2. 本品适用于NC膜和PVDF膜,推荐使用PVDF膜,效果更佳。
3. Alphabio® 抗体剥夺液具有轻微腐蚀性,操作时请注意个人防护,佩戴实验服和一次性手套。
本产品仅限专业科研用途,不可用于临床诊断、治疗,也不得用于食品或药品生产,禁止存放于普通住宅环境中。