一、产品信息：

货号：E0141 

规格：100次/盒。

储存条件：-20℃避光保存。

有效期：自生产日期起12个月。

二、产品简介：

支原体是细胞培养中常见的污染物，可通过气溶胶传播并干扰细胞代谢。本试剂盒基于PCR技术，针对支原体16s rRNA基因保守区设计特异性引物，可检测包括人型支原体（M. hominis）、猪鼻支原体（M. hyorhinis）等至少11种常见支原体。与传统培养法（需28天）相比，本试剂盒可在3小时内完成检测，灵敏度达50拷贝/反应，适用于细胞培养物、血清等样本。

三、试剂盒组分：

四、实验步骤：

1. 样本处理：

贴壁细胞：直接吸取上清。建议在细胞传代或换液 3 天以上，且汇合度达到 90%左右时取样，此时上清中支原体含量较高，便于检出。 

悬浮细胞：500 g 离心 5 min 后，吸取上清。建议在细胞传代或换液 3 天以上时取样，此时支原体含量较高，便于检出。

2. PCR体系配制：

注：阴性对照用ddH2O替代模板，阳性对照最后加入。

3. PCR扩增程序：

4. 电泳分析：

制备1%琼脂糖凝胶，取10 μL PCR产物点样，120 V电泳30 min。

预期结果：阳性样本在500 bp处可见清晰条带。

五、结果判读：

六、注意事项：

1. 防污染措施： 分区域操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区）。使用带滤芯吸头，全程佩戴口罩。

2. 灵敏度优化：若样本含抗生素，建议检测前在不含抗生素的培养基中培养2-3天。

3. 特殊样本处理：高浓度DMSO或细胞密度＞10⁷/mL时，需稀释后检测。

本说明书整合了行业最新技术标准，兼顾操作便捷性与检测可靠性，适用于科研级快速筛查需求。